截至2025年9月17日，电影731的首映预售场次已突破23.6万场，超越此前速度与激情9与复仇者联盟4：终局之战首日22.8万场的纪录，登顶中国影史上映首日场次最高影片。
影片预售总票房于前一日突破1亿元，成为2025年春节档之后首部预售票房破亿且未包含点映成绩的作品。根据专业票房预测模型显示，731预计在首映日实现票房收入约2.11亿元。
影片背景设定于1945年抗战胜利前夕，讲述侵华日军第七三一部队在哈尔滨平房区以所谓“给水防疫”为掩护，秘密开展细菌武器研究，大规模抓捕平民实施活体实验，企图以非人道手段扭转战局。
主人公王永章本是一名普通小贩，与其他平民一同被强行关押进所谓的“特设监狱”。日军以“配合健康检查和防疫研究便可获释”为诱饵，欺骗他们接受冻伤、毒气及活体解剖等极端人体实验。影片通过这些普通人的遭遇，真实揭露日军在战争期间所犯下的反人类罪行。
作品以个体命运折射民族苦难，展现身处绝境中的中国人不屈不挠的抗争意志，旨在唤起观众对历史真相的认知，铭记国耻，珍视和平，警示未来。
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